تحضير جبل من البكتريا الرطبة لمراقبة شكلها الطبيعي وحجمها

تهدف إلى إعداد جبل رطب للبكتيريا ، وذلك لمراقبة شكله الطبيعي وحجمه وترتيبه في حالة المعيشة.

غرض:

يمكن رؤية خلايا البكتيريا بسهولة ووضوح ، عند تلوينها بالبقع ، ولكن في معظم عمليات التلوين ، تموت الخلايا وتفقد شكلها الطبيعي وحجمها بسبب التثبيت الحراري وكذلك بسبب التعرض للمواد الكيميائية (البقع والحامض و الكحول).

الهدف من هذه التجربة هو مراقبة الشكل الطبيعي وحجم وترتيب البكتيريا في حالة المعيشة. لا يمكن ملاحظة الحركة في الحامل الرطب ، حيث يتم الضغط على الخلايا بين الشريحة وزلة الغطاء.

المبدأ:

في الحوض الرطب ، يتم وضع قطرة من تعليق البكتريا على شريحة ، مغطاة بغطاء غطاء وملاحظ تحت المجهر المركب أو يفضل تحت مجهر الحقل المظلم أو الطور باستخدام هدف الغمر بالزيت.

المواد المطلوبة:

الشريحة الزجاجية ، زلة الغطاء ، الفازلين ، زيت الغمر (زيت خشب الأرز أو البارافين السائل) ، ثقافة البكتريا (على وسط صلب أو معلق سائل) ، حلقة ومجهر (مركب ، حقل مظلم أو تباين طوري).

إجراء:

1. يتم تنظيف الشريحة بشكل صحيح تحت ماء الصنبور ، بحيث لا تبقى المياه كقطرات على سطحها (الشكل 5.2).

2. يتم تجفيف الشريحة عن طريق المسح باستخدام ورق ماص ، ثم تحريكه فوق اللهب أو حفظه في الشمس.

3. إذا كانت البكتيريا قد نمت على وسط صلب (مثل الثقافة المائلة أو ثقافة الطبق) ، يتم وضع قطرة من الماء المقطر في مركز الشريحة. يتم تعقيم حلقة عن طريق تسخينها على اللهب إلى الأحمر الساخن. يتم تبريده لدرجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، معقمًا معقمًا ، يتم قسمة جزء صغير من ثقافة البكتيريا بواسطة الحلقة ونقلها إلى قطرة الماء.

يتم إجراء تعليق للبكتيريا عن طريق خلط حلقة البكتيريا برفق في قطرة الماء ، بحيث لا ينتشر الهبوط. إذا نمت في وسيط وسيط كمعلق ، معقمًا ، يتم وضع قطرة من تعليق البكتيريا في مركز الشريحة مباشرةً ، باستخدام حلقة معقمة باللهب.

4. يتم تطبيق هلام البترول أو مادة مماثلة المحيطة بالسقوط ، بحيث عندما يكون غطاء الغطاء يغطي القطرة ، يتم تقليل تبخر وتأثير تيار الهواء.

5. يتم الاحتفاظ بغطاء غطاء في وضع مائل بالقرب من قطرة تعليق البكتيريا مع حافة واحدة تلامس الشريحة.

6. ببطء ينزلق زلة الغطاء ، حتى يلمس سطح الانخفاض.

7. ثم ، يتم تحرير زلة الغطاء ، بحيث ينتشر قطرة من تعليق البكتيريا في جميع الاتجاهات تحت زلة الغطاء. يجب توخي الحذر ، بحيث لا تتشكل فقاعة هواء في التعليق.

8. يتم قص الشريحة على مرحلة مجهر مركب وملاحظة استخدام الطاقة المنخفضة والأهداف الجافة العالية. ثم ، يتم وضع قطرة من زيت الغمر على زلة الغطاء ولاحظ باستخدام الهدف الغمر بالزيت من المجهر. على نحو مفضل ، يجب استخدام مجهر طوري أو مجهر حقل مظلم لملاحظة واضحة.