دراسة ملاحظات حول قياس التدفق الخلوي

المادة المذكورة أدناه يوفر ملاحظات الدراسة على التدفق الخلوي مسبقا.

قياس التدفق الخلوي هو التقنية الحديثة التي تم تطويرها خلال العقدين الأخيرين لدراسة محتويات الخلية خاصة كفاءة التعبئة النووية. بالإضافة إلى NPE ، يمكن تحليل الخصائص الفيزيائية والكيميائية لمحتويات الخلايا المختلفة والظروف المرضية بسرعة مع الاستنتاج الصحيح.

أجهزة قياس التدفق الخلوي متوفرة في السوق على شكل آلة. تتكون الماكينة من نظام مائع ، نظام بصري لجمع إشارات ضوئية يتم توليدها كخلايا تمر عبر الليزر. كما يتم تزويد الماكينة بنظام إلكتروني يحول الإشارات الضوئية إلى إشارات إلكترونية متناسبة يتم ترقيمها في النهاية لأغراض تحليل الكمبيوتر.

حوالي 5000 خلية في الثانية ، قياس فردي واحد تلو الآخر ، من تعليق السكان غير المتجانسة يمكن مسحها.

يتم توفير نظام Fludics المتطور مع الليزر والبصريات والالكترونيات والفرز. يحتوي نظام Fludics على Fluorescence Activated Cell Sorter (نظام FACS Calibur fluids) ، وأثناء الفرز يمكنه فرز دقة عدد الخلايا الفردية.

والنتيجة هي نقاء عالية مع الانتعاش الذي يقع بين خلية واحدة والاسترداد. تم التحكم به إلكترونيًا بثلاثة أزرار لتحديد وضع التشغيل PRIME و STAND BY و RUN. معدل ضوابط عالية؛ (60ul / min.) ، متوسطة (35 ul / min) ومنخفضة (12 ul / دقيقة).

إن الإثارة والانبعاث ، الفلوروكرومات ، الفلاتر وتعويض اللون هي جزء مهم من المعدات. 530/30 فلتر BP يقيس الإشارات المنبعثة من الإسفانوسيانات (Flain). إذا تم استخدام Phycoerythrin و Popidium Iodide ، فسيتم استخدام فلتر 585/42 BP. يتم استخدام مرشحات 650 LP إذا تم إنشاء Peridinin Chlorophyll و 7-Amino-Actinomycin D Signal.

يتم قراءة إشارات الليزر بواسطة برنامج البحث عن خلية Becton Dickinson. يجب ضبط كاشف الفلورسنت وفلاتر النطاق حسب تعليمات ومتطلبات الصك. يوجد 488 نانومتر من مصادر ضوء ليزر الأرجون وفلتر تمرير 623 نانومتر بشكل شائع في المعدات.

كما أن لديها نظامًا لعرض البيانات والتحليل. المعلمات الهامة هي الرسوم البيانية ، والبيانات متعددة المعلمات ، وبيانات وضع القائمة والنشوء. التحليل الآلي للبيانات بمساعدة البرامج المقدمة وإعطاء الرسم البياني لمحتوى الدنا مقابل العد الذي يتم عرضه على الكمبيوتر تلقائيًا (49.2).

إن تطبيقات مقياس التدفق الخلوي عديدة وتُعد بمثابة نعمة للبحث البيولوجي وللتحقيقات السريرية في العديد من الأمراض البشرية. يستخدم عداد الكريات تدفق لدراسة الأنساب الدم في الأنسجة الهيموبوبائية في خلايا الكلى الرأس من أسماك التنفس الهواء.

يمكن أن يكون من السهل التمييز بين الخلايا الجذعية المكونة للدم متعددة القدرات والظاهرة الظاهرية لسكان اللمفاويات الطرفية الناضجة الوظيفية. الاستخدام الكبير لهذه المعدات هو دراسة موت الخلايا المبرمج أو موت الخلية وأيضاً لدراسة نخر الخلية بسبب سمية مبيدات الآفات.

بسبب إشارات الانتثار ذات الزاوية العريضة ، يمكن حل الخلايا الليمفاوية والخلايا الأحادية والخلايا المحببة من عينات الدم الكامل. من الممكن أيضًا فصل الصفائح من الضوضاء الخلفية. يتم استخدامه للجهاز المناعي وفي immunophenotyping. يتم استخدامه لدراسة سرطان الدم ، ورم الغدد اللمفاوية ، بحوث زرع ، تعداد شبكي وتحليل محتويات الحمض النووي الخلوي.

نظرًا لآلية معالجة النبض ، من المفيد تحليل تحليل خلية DNA. يستخدم تحليل NPE للتمييز بين سرطان الثدي الأولي والورم الخبيث وسرطان القولون الابتدائي والقولون النقيلي وكذلك سرطان المعدة والمبيض (الشكل 49.2).

البروتوكول المستخدم هو أن الخلايا الأولى أزيلت وثبتت في 3 ٪ بارافورمالدهيد. هي permeabilized مع 0.5٪ Triton x 100. ثم تم وصف الحمض النووي النووي مع يوديد popidium بعد العلاج ريبونوكلياز باستخدام دورة اختبار DNA DNA.