العلاقة السريرية لاختبار Coomb (اختبار مضادات الجلوبيولين)

اختبار Coombs هو أسلوب بسيط وبارع. تم وصف اختبار كومبس لأول مرة في عام 1908 من قبل Moreschi وتم اكتشافه لاحقا من قبل RR Coombs وزملاء العمل في عام 1945 لإثبات الأجسام المضادة غير المتأصلة لمستضدات خلايا الدم الحمراء.

(يطلق على الأجسام المضادة اسم الأجسام المضادة "غير الملتصقة" لأن الأجسام المضادة لا يمكن أن تسبب تراصًا ، على الرغم من ارتباطها بالمستضدات على كرات الدم الحمراء. كما يشار إلى الأجسام المضادة أحيانًا باسم "الأجسام المضادة غير المكتملة" نظرًا لأن الأضداد لا تسبب ولكن لا يوجد نقص في بنية جزيء الأضداد.)

في الواقع ، ترتبط الأجسام المضادة غير الملتصقة بالمستضدات الموجودة على سطح كرات الدم الحمراء. لكن التراص المتوقع من كرات الدم الحمراء لا يحدث. عندما تتم إضافة جسم مضاد آخر (يسمى مضاد الجسم المضاد أو مضاد الجلجولين) ضد الجسم المضاد المرتبط بـ RBC ، يحدث تراص. ترتبط الأجسام المضادة إلى مناطق Fc من الأجسام المضادة المرتبطة بـ RBC وتشكل شبكية ، مما يؤدي إلى تراص. يسمى الاختبار اختبار مضادات الجلوبيولين أو اختبار Coombs.

هناك نوعان من اختبارات مكافحة الجلوبيولين:

1. اختبار مضاد الجلوبيولين المباشر (DAT)

2. اختبار مكافحة الغلوبيولين غير المباشر (lAT)

1. يستخدم اختبار مكافحة الجلوبيولين المباشر (DAT) للكشف عن الأجسام المضادة ، والتي لا بد من كرات الدم الحمراء في الجسم الحي.

يتم خلط كرات الدم الحمراء غسلها من المريض مع مكافحة الجلوبيولين.

↓

ترتبط مضادات الجلوبولين بالأجسام المضادة غير المتكتلة على سطح كرات الدم الحمراء وتسبب تراصًا واضحًا. نتيجة الاختبار هي DAT إيجابية (الشكل 16.6).

لذا ، تشير DAT الإيجابية إلى أن كرات الدم الحمراء لدى المريض مغطاة بأجسام مضادة غير ماصة ، ويقال إن المريض يكون DAT موجبًا.

أنا. تحدث DAT إيجابية مع كرات الدم الحمراء من الأطفال حديثي الولادة مع مرض الانحلالي من الأطفال حديثي الولادة (يتم ملؤها كرات الدم الحمراء من HDN مع الأجسام المضادة المضادة لل Rh).

ثانيا. حاليا ، يتم استخدام DAT للكشف عن الأجسام المضادة IgG و C3b منضمة إلى سطح كرات الدم الحمراء. في المرضى الذين يعانون من انحلال الدم ، فإن اختبار DAT مفيد في تحديد ما إذا كان انحلال الدم هو من المسببات المناعية أم لا.

الشكل 16.6: اختبار تراص Coomb المباشر (DAT).

يتم استخدام DAT للكشف عن وجود الأجسام المضادة غير الملتصقة على سطح كرات الدم الحمراء. A. يتم خلط كرات الدم الحمراء التي يتم غسلها مع كاشف مضاد الغلوبولين. ترتبط مضادات الجلوبولين بمناطق Fc للأجسام المضادة المرتبطة بـ RBC وتسبب تراصًا مرئيًا ، ويقال إن الفرد يكون DAT موجبًا. B. إذا كانت كرات الدم الحمراء غير مغلفة بأجسام مضادة ، فلن يكون هناك تراص ، ويقال أن الفرد هو DAT سلبي. يتم أيضًا استخدام DAT للكشف عن وجود كرات الدم الحمراء المبطنة المضادة لل Rh التي يصيب الأطفال حديثي الولادة الذين يُشتبه في أنهم يعانون من مرض انحلالي لحديثي الولادة.

أنا. الأسباب غير المحصنة لانحلال الدم [مثل التخثر المنتشر داخل الأوعية الدموية ونقص إنزيمات الخلايا الحمراء [مثل نقص هضم الغلوكوز 6-فوسفات (G6PD) وعيوب غشاء الخلية الحمراء (مثل كثرة الكريات الحمر الوراثي و PNH) وهيموغلوبين (مثل فقر الدم المنجلي ، الثلاسيميا)] DAT سلبي.

ثانيا. الأسباب المناعية لانحلال الدم (مثل فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي ، انحلال الدم الناجم عن المخدرات ، تفاعلات التحلل الدموي) هي DAT إيجابية.

ثالثا. وينظر إلى DAT إيجابية بسبب C3 وحده في المرضى الذين يعانون من الأجسام المضادة الباردة ، الهيموغلوبين البرد الانتيابي ، وفي بعض الحالات من فقر الدم الانحلالي الناجم عن المخدرات.

2. يستخدم اختبار التراص غير المباشر (IAT) للكشف عن وجود الأجسام المضادة غير المرتبط ضد كرات الدم الحمراء في مصل المريض.

أنا. IAT للكشف عن الأجسام المضادة المضادة لل Rh في مصل الأم:

يتم تحضين مصل الأم مع RBCs الدم إيجابية Rh المجموعة. إذا كانت الأجسام المضادة المضادة لل Rh موجودة في مصل الأم فإن الأجسام المضادة سترتبط مع كرات الدم الحمراء. ثم يتم غسل كرات الدم الحمراء.

↓

ثم يتم إضافة كاشف مضاد الجلوبيولين.

↓

إذا كانت الأجسام المضادة المضادة لل Rh موجودة في مصل الأم ، سوف يتم رش كرات الدم الحمراء و يكون الاختبار إيجابيًا بالنسبة لـ IAT.

ثانيا. IAT للكشف عن الأجسام المضادة في مصل المتلقي ضد RBCs المانحة خلال نقل الدم:

يستخدم اختبار IAT على نطاق واسع (قبل نقل الدم) في التقاطع مع كرات الدم الحمراء للمتبرع مع مصل المتلقي للكشف عن وجود الأجسام المضادة في المتلقي ، والتي قد تتفاعل مع كرات الدم الحمراء لدى المتبرع.

يغسل كرات الدم الحمراء من المتبرع.

↓

إضافة مصل المستلم إلى كرات الدم الحمراء واحتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

↓

يغسل كرات الدم الحمراء.

↓

إضافة كاشف مكافحة الجلوبيولين.

يشير تراص التلاؤم إلى أن مصل المستلم يحتوي على أجسام مضادة ضد كرات الدم الحمراء من المتبرع وأن الاختبار هو إيجابي بالنسبة للأجسام المضادة. تشير نتيجة IAT الإيجابية إلى أنه لا ينبغي نقل دم المانح المقترح إلى المستلم المعني.

يحتوي كاشف اختبار مضاد الغلوبولين الحالي (ويسمى أيضًا كاشف Coombs ') على' 'كوكتيل' 'من الأجسام المضادة أحادية النسيلة الموجهة ضد IgG و C3b البشري (يؤدي تجانس الأجسام المضادة غير المتراصة إلى كرات الدم الحمراء إلى تنشيط النظام المكمل مما يؤدي إلى ترسب أجزاء C3b فوق كرات الدم الحمراء ، وبالتالي بصرف النظر عن الأجسام المضادة ، يتم تغليف كرات الدم الحمراء (RBCs) بشظايا C3b أيضًا).