Immunodiffusion من المستضد أو الأجسام المضادة

Immunodiffusion من مستضد أو الأجسام المضادة!

يشير Immunodiffusion إلى حركة المستضد أو الجسم المضاد أو كل من مستضد وجزيئات الأضداد في وسيط دعم بالانتشار.

يرتبط المستضد والجسم المضاد ببعضهما البعض ويشكلان مناعيًا غير قابل للذوبان ، والذي يكون مرئيًا للعين المجردة على هيئة رباط أو خط. وصف J. Oudin نظام الانتشار الفردي للمستضد والجسم المضاد في الأنابيب المملوءة بآجار.

سرعان ما وصف Ouchterlony انتشار مزدوج في أجار ، الطبقات على الشرائح. الحركة كما هو موضح إما خطي أو شعاعي. يتم استخدام أساليب immunodiffusion للتحليل النوعي والكمي لبروتينات المصل. ومع ذلك ، فقد استبدلت أكثر الطرق حساسية ومحددة مثل مقايسة المناعية المرتبطة بالأنزيمات (ELISA) والمناعة المناعية الراديوية (RIA) تقريبًا طرق التحلل المناعي.

وحيد immunodiffusion:

يبقى المستضد أو الجسم المضاد ثابتًا ويتحرك المتفاعل الآخر (تقنية إنتشار أودين).

ضعف Immunodiffusion:

كل من المستضد والجسم المضاد يتمتعان بحرية التحرك تجاه بعضهما البعض. (تقنية Ouchterlony).

يتم صب أجار المنصهر على شريحة زجاجية أو petridish ويسمح لترسيخ. يتم ثقب اثنين من الآبار الصغيرة على بعد بضعة مليمترات. يتم إسقاط المستضد والحلول المضادة المقابلة في الآبار المقابلة. ثم يتم الاحتفاظ الشريحة / petridish في غرفة رطبة لمدة 18-24 ساعة. يتحرك المستضد والجسم المضاد من خلال الأجار ويجمعان لتشكيل مركب مستضد-جسم مضاد. يمكن رؤية مجموعة مولدات المضاد-المستضد كخط ترسيب.

كما يتم إجراء الانتشار المزدوج عن طريق وضع آبار المستضد والأجسام المضادة في زوايا مختلفة لأغراض المقارنة. الأنماط الثلاثة لهذه التفاعلات موضحة في الشكل 27.2.

أنا. رد فعل الهوية:

المستضدات في اثنين من الآبار متطابقة (Agl و Ag2). لذا فإن التفاعل مع الجسم المضاد ينتج عنه خطوط مسببة للرخام مشابهة بدقة. لا تعبر خطوط المرسبتين ، بل تشكل خطًا متواصلًا. يشير الانصهار للخطين الفربيتين إلى أن الجسم المضاد يتفاعل مع الحواتم التي توجد عادة على المستضدين.

ثانيا. رد فعل عدم الهوية:

يوجد مستضدان غير متطابقان (Agl و Ag3) في الآبار المستضدية بينما يحتوي الجسم المضاد على أجسام مضادة لكل من المستضدات. تختلف خطوط المرسبين المضاد للمستضد والجسم المضاد عن بعضها البعض. ومن ثم ، فإن الخطين العظميين يعبران تمامًا (يتقاطعان) بعضهما البعض.

ثالثا. رد فعل الهوية الجزئية:

وتشارك جزئيا المحددات antigenic في المستضدات من اثنين من الآبار (Agl و Agla). وبالتالي يتفاعل الجسم المضاد مع كل من المستضدات وخطوط الأشكال التي لا تشكل صليبًا كاملاً. يعبر خط المرسبتين في اتجاه واحد فقط. يشار إلى خط precipitin الموسعة باعتبارها مهماز. يشير الحافز إلى أن الجسم المضاد يقوم أيضًا بترسيب قمة لاصقة إضافية غير موجودة في أحد المستضدات.

يمكن أيضًا استخدام فحص المناعة المزدوج في التحليل الكمي شبه للمستضد أو الجسم المضاد (الشكل 27.3):

الشكل 27-3:

ضعف المناعية للتحليل شبه الكمي للمستضد. يتم وضع الجسم المضاد في البئر المركزي ويتم وضع المستضد بتركيزات مختلفة في الآبار الطرفية

أنا. كمية المستضد:

يتم تمييع المستضد X بشكل متسلسل ووضعه في الآبار المحيطة بالبئر المركزي حيث يتم وضع الجسم المضاد لـ X. ينتشر المستضد والجسم المضاد من الآبار ويتفاعلان مع بعضهما البعض ، مما ينتج عنه تكوين خطوط مسببة للركب بين مستضد و آبار جسم مضاد. تتناقص كمية الأجسام المضادة لمستضد المستضد مع تناقص كميات المستضدات في الآبار المختلفة. ولذلك ، فإن سمك خطوط precipitin يقلل مع انخفاض تركيز antigen.

ثانيا. تحديد كمية الأجسام المضادة:

يتم استخدام إجراء شبيه بكمية المستضد ، إلا أنه يتم تغيير موضع المستضد والجسم المضاد. يتم وضع المستضد في البئر المركزي ويتم وضع الجسم المضاد عند تخفيفات مختلفة في الآبار الخارجية.

وحيد شعاعي Immunodiffusion:

قدم مانشيني هذه التقنية الجديدة لتقدير الكميات الدقيقة من المستضدات. يتم خلط الأجسام المضادة مع أجار منصهر وسكب في طبق بتري. بعد التصلب من أجار ، يتم قطع الآبار ، ومليئة بتراكيز مختلفة من مولد الضد (الشكل 27.4).

ينتشر المستضد من البئر ويشكل تعقيدات الأجسام المضادة لمضاد المستضد في 48-72 ساعة. وينظر إلى الراسب على أنه خط دائري أبيض حول كل بئر. قطر الحلقة الدائري يتناسب طرديا مع تركيز المستضد (أي تركيز المستضد أكثر ، وقطر الراسب هو أكثر).

يمكن رسم المنحنى المعياري في ورقة الرسم البياني عن طريق رسم تراكيز المستضد المعروفة في المحور X والأقطار في المحور Y. يمكن تحديد مستضد الاختبار ، الذي يكون تركيزه غير معروف ، عن طريق تقريب المنحنى القياسي مع قطر الراسب المتكون بواسطة مستضد الاختبار.

حساسية هذه الطريقة هي 1-3 ميكروغرام / مل من المستضد. تُستخدم هذه الطريقة لتحديد تراكيز IgG أو IgM أو IgA (عن طريق الدمج في مضاد أجار IgG أو مضاد IgM أو مضاد IgA على التوالي).