تقنيات المقايسة المناعية للكشف عن مستضدات الأورام

تستخدم المقايسات المناعية الكيميائية على نطاق واسع للكشف عن المستضدات الورمية وتصنيف أنواع الخلايا اللمفاوية في أقسام الأمراض الجراحية.

يتم تثبيت عينة الأنسجة على شريحة زجاجية.

↓

يتم وضع الأنزيم المسمى mAb (conjugate) فوق العينة ويحضن.

أنا. إذا كان للعينة مستضد محدد مقابل mAb ، يرتبط الارتباط بمولد الضد على العينة.

↓

بعد الغسيل ، يضاف الركيزة وتحضن.

أنا. يشير تطوير اللون إلى أن مستضد معين مقابل mAb موجود في قسم الأنسجة.

ثانيا. في غياب مستضد محدد ، لا يوجد تطور اللون.

↓

يتم غسل الشريحة وينظر إلى قسم الأنسجة تحت المجهر لوجود اللون.

الفجل البيروكسيديز (HRP) هو الانزيم الذي يشيع استخدامه في تقنيات المناعى الكيميائي. الركيزة ل HRP هي بيروكسيد الهيدروجين و diamino - benzidine. رد فعل من HRP مع diaminobenzidine ينتج لون أسود.

البيروكسيديز - antiperoxidase (PAP) هو طريقة أخرى تستخدم في علم الأمراض الجراحية للكشف عن الإنزيمات والمستضدات ذات الصلة بالأورام.

إنها طريقة من ثلاث خطوات:

الخطوة 1:

يتم تثبيت الأنسجة المشتبه في كونها مستضد معين على شريحة زجاجية.

↓

يتم إسقاط أضداد الأرانب المعروفة إلى المستضد المعني على الأنسجة (المشتبه في كونها مستضد) مثبتة على شريحة زجاجية.

أنا. إذا كان المستضد المطابق يحدث في النسيج ، فإن الجسم المضاد يرتبط به. يتم غسل الشريحة بعد الحضانة.

↓

الخطوة 2:

يتم إسقاط الجلوبيولين المناعي المضاد للأرانب (يسمى الأجسام المضادة للارتباط) على الشريحة.

أنا. إذا حدث أضداد أرنب في الشريحة (مرتبط بالمستضد) ، فإن الغلوبولين المناعي للأرانب يرتبط بالأجسام المضادة للأرانب. بعد الحضانة يتم غسل الشريحة.

↓

الخطوات 3:

يتم إسقاط مجمع مناعي ، يتكون من أضداد الأرانب إلى البيروكسيديز ، جنبا إلى جنب مع البيروكسيديز. سترتبط هذه الأجسام المضادة للأرانب بجلوبيولين مضاد الأرانب (الرابط الثاني للجسم المضاد) عبر منطقة Fc الخاصة به. بعد الحضانة يتم غسل الشريحة.

↓

وأخيرا ، يضاف الركيزة البيروكسيديز. سوف تتفاعل الركيزة مع البيروكسيديز مما يؤدي إلى تكوين منتج ملون ينظر إليه تحت المجهر.

أنا. يشير وجود المنتج الملون على الأنسجة إلى وجود المستضد المطابق.

ثانيا. يدل غياب المنتج الملون على الشريحة على أن المستضد المعني غير موجود في الأنسجة.